PEG400DO（聚乙二醇400双油酸酯）在毒理学上被归类为低毒类物质。其急性经口毒性极低，大鼠经口LD50大于5000 mg/kg，在日常工业和消费品配方中的暴露水平下，不会构成系统性中毒风险。然而，本品对人体局部刺激性不可忽视——直接接触可能引起皮肤刺激（H315），溅入眼睛会造成严重眼刺激（H319），吸入其蒸气或雾滴则可能引发呼吸道刺激（H335）。这些危害类别均为GHS分类中的第2类或第3类，属于中等程度的可逆性刺激，而非腐蚀性或永久性损伤。
在环境方面，PEG400DO的生态毒性等级相对温和。研究表明其可能对水生生物产生一定有害影响，但由于该产品易于生物降解，在自然环境中不会长期残留富集。废水处理系统中的微生物可有效将其分解，不会对水体生态系统造成持续性危害。总体而言，只要按照规范进行排放处理，其对环境的影响是可控且较小的。
| 安全指标 | 参数 |
|---|---|
| GHS皮肤刺激分类 | 类别2（引起皮肤刺激） |
| GHS眼刺激分类 | 类别2（引起严重眼刺激） |
| GHS特定靶器官毒性（单次接触） | 类别3（呼吸道刺激） |
| 急性经口毒性（大鼠） | LD50 > 5000 mg/kg |
| 生物降解性 | 易生物降解 |
| 水生生态毒性 | 可能对水生生物产生有害影响 |
| 总体毒性等级 | 低毒类物质 |
基于其安全性特征，PEG400DO可安全应用于个人护理品（洁面乳、沐浴露、卸妆油等）、纺织油剂、金属加工液、农用化学品制剂及工业润滑剂等领域。配方中添加量通常在1%~10%之间，在此浓度范围内，成品的皮肤刺激性已大幅降低。作为非离子表面活性剂，其温和特性使其尤其适用于对皮肤友好度要求较高的日化产品配方。